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    产品/Product
    2×SYBR Green qPCR Mix(预混ROX2)
    发布时间: 2018-11-18 16:30:12 | 次浏览


    产品名称 品牌 货号 规格 目录价
    2×SYBR Green qPCR Mix
    (ROX独立包装)
    EZBioscience A0001 5 ml 1000
    2×SYBR Green qPCR Mix
    (预混ROX1)
    EZBioscience A0001-R1 5 ml 1000
    2×SYBR Green qPCR Mix
    (预混ROX2)
    EZBioscience A0001-R2 5 ml 1000
    2×SYBR Green Color qPCR Mix(彩色qPCR试剂盒) EZBioscience A0012 5 ml 1200

    2×SYBR Green qPCR Master Mix ( ROX2 plus)
     

    Cat. No.: A0001-R2
     
    一、试剂盒简介
            本试剂盒采用了具有超强扩增能力和抗干扰能力的热启动DNA聚合酶,结合其高度优化的缓冲液体系和染料系统,使之具备了更强的扩增效率、抗干扰能力,更高的灵敏度和特异性。具有起峰更早,在相同情况下得到的荧光信号更强,Ct值更小,熔解曲线特异性更高等特点。此外,为了进一步简化操作,该试剂盒的2× SYBR Green qPCR mix预混了ROX2染料(low Rox),从而只需要将模板cDNA、引物以及 ddH2O添加进去,即可进行qPCR反应。
     
    二、产品组分

    Components A0001-R2 (500Rxns)
    2× SYBR Green qPCR Master Mix*1 5 ml
    *1:包含Hot-start DNA Polymerase, dNTPs, Mg2+和Buffer,同时预混了ROX2,用于校正不同孔之间产生的荧光信号误差。
     
    三、试剂保存条件
    本试剂建议置于-20℃避光保存。
     
    四、适用的仪器型号(如果仪器不在下表中,请用A0001-R1A0001):

    ABI 7500, 7500 Fast, Quanti-Studio 3, 5, 6, 7, 12K Flex, Dx, ViiA™7; Stratagene MX4000™, MX3000P™, MX3005P™
    Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon 2, Chromo4™;
    Cepheid SmartCycler®; Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Illumina Eco qPCR;
    Qiagen/Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000;
    Roche LightCyclerTM 480;
    Thermo Scientific PikoReal Cycler.
     
    五、关于qPCR反应是否良好的判断:
    1、如果扩增曲线呈典型的S型曲线,背景荧光信号阶段、荧光指数扩增阶段及平台期均完整可见,熔解曲线单峰,内参Ct值在合理范围内(通常可在13 ~ 22之间,典型的内参Ct值在15 ~ 20之间),则可认为该反应正常;
    2、如果同一个模板和引物的重复孔数据Ct值相差0.5以内;
    同时满足以上两个条件的可以认为数据可用。
     
    六、常见的注意事项、操作要点及优化方法:
    1、实验开始前首先验证引物是否适用,标准与上述标准类似,主要观察扩增曲线与熔解曲线;
    2、引物验证后应该分装为几份,防止污染或降解;
    3、RNA的质量及cDNA的质量对qPCR的结果具有很大的影响,应尽量保证RNA不降解,通常建议RNA提取后尽快进行逆转录,避免反复冻融,或者多次逆转录。如果预计使用量较大,则可以一次多逆转几管cDNA。如果条件允许,cDNA建议优先保存在-80℃冰箱。
     
    七、关于qPCR引物的设计:
    1、首先可以查询Google Scholar中的文献当中的引物,通常中等及以上水平期刊中的qPCR引物绝大多数可以直接使用;
    2、NCBI数据库的Blast数据库中的primer blast提供了针对序列或者Gene ID的qPCR引物设计方案,可以每个基因设计2对引物,并进行合成、验证;
    3、Primer Bank数据库中有部分已经验证过的引物可用,也可作为参考。
     
     
    备注:PDF版英文说明书请在“技术资料”---“说明书下载”栏目中下载。
     




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